光度計主要是用來測量不同波長的光譜,從而對物質進行定量分析。西安紫外可見分光光度計是對波長在紫外光區里波長的測量,測量的原理是,物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量, 相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。紫外可見分光光度計的應用波長范圍為200~400nm的紫外光區、400~850nm的可見光區。
紫外可見分光光度計主要用于對物質的分析,與標準物及標準圖譜對照,比較最大吸收波長吸收系數的一致性。也可用于推測化合物的分子結構及絡合物組成及穩定常數的測定。在外分光光度計一般都設有雙通道,其中一個通道是拿來放空白樣的,也可以說是參比樣。操作的時候,首先是將兩個比色皿都充滿空白液,用其中一個為基準調零,然后再測另一個比色皿,記下讀書,這個是空白0對應的吸光度值,也就是由于比色皿不同帶來的誤差,在作圖的時候是要算進去的。然后,把那個認為是樣品的比色皿里的空白液換成真正的樣品,測量其吸光度值。通過雙通道,可以避免比色皿不同帶來的誤差。使用紫外分光光度計之前,要調零、調百校準,參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應是一條平坦的直線。有時,基體中雖不含被測物質,但含有別的物質,這時必須保證其不影響測試。經常碰到的是試劑空白中含有被測物質,此時必須經過純化將其除去,否則將影響測定結果。在色譜分析中,有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰,計算機在數據處理中不會計入它們,不影響測定。參比溶液與測量溶液就相差鐵離子含量,在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描,調整儀器后(調100的過程),然后再測量含鐵離子溶液的比色皿,這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值,次峰值與數據庫里基準峰值對比就可以得出溶液所含量了。如果數據庫中沒有鐵離子的曲線,你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線,然后進行測量。
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